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對人參皂苷對照品進行定性和理化鑒別
日期：2019-01-10瀏覽：791次
對人參皂苷對照品進行定性和理化鑒別
由于人參皂苷Rh2的抗癌機制與傳統藥物不同，它不具有細胞毒性，不直接殺傷癌細胞，也不會傷害正常細胞，而是通過對癌細胞的分化誘導來實現抑制癌細胞增殖、改變癌細胞功能，隨著人參皂苷Rh2濃度的升高，黑色素瘤B16細胞存活率逐步下降，經人參皂苷Rh2處理的B16黑色素瘤細胞穿越小室的細胞數明顯減少，并呈劑量效應關系。已有研究顯示，黑色素瘤與基底膜的黏附作用受與層粘連蛋白(LN)受體a6、B4等的影響。而人參皂苷Rh2能夠通過影響這些粘連蛋白，來減少腫瘤細胞侵襲轉移的能力。
人參皂苷對照品含量測定鑒定
1.定性鑒別：
?、偃悠?～2mg，置白瓷板上，加4%硫酸溶液4滴，逐漸變為橙黃色至橙紅色。
?、谌悠?g，加水10ml，攪拌溶解，分為2等份，取一份置試管中，強力振搖，產生持久性泡沫，一份加稀H2SO4，即生成大量沉淀，再加過量氨溶液沉淀又復溶解。
2.定量鑒別：
取樣品6g，到萬分之一，加蒸餾水50ml溶解后，移于100ml容量瓶中，用乙醇稀釋到刻度，攪勻，靜置12h，用吸液管取上清液25ml，置燒杯中，加氨試液3滴，置水浴上蒸發至稠膏狀，加水30ml溶解，緩慢加入3%鹽酸5ml，在冰水中靜置30min左右，過濾，沉淀物用冰水洗滌4次，每次用冰水5ml，棄去洗液及濾液，收沉淀物在濾紙上放置2～3h后，干燥稱重。
遇光顏色轉深。有苦味。熔點177～178℃。于95～97℃下干燥則成兩分子結晶水物。于110℃真空(1.33×103Pa)下干燥12h后成無水物。無水物易潮解，熔點190～192℃，在大氣中可吸收2.5分子的水。于冷水中溶解度為0.012%，熱水中溶解度為5%。微溶于乙醇。
人參皂苷對照品理化鑒別：
1.試管反應:本品乙醇浸液,滴加三氯化銻lv仿飽和溶液,顯紫色（檢查人參皂甙）．
2.薄層層析:
樣品液取本品粉末1ｇ,加lv仿40ｍｌ,置水浴上回流1小時,棄去lv仿液,藥渣揮干殘存溶劑,加水0.5ｍｌ拌勻濕潤后,加水飽和的正丁醇10ｍｌ,超聲處理30分鐘,吸取上清液,加氨試液3倍量,搖勻,放置分層,取上層液蒸干加甲醇溶解,使成1ｍｌ．對照品液取人參皂甙Rb1、Re、Rg1,加甲醇溶解,使成2mg/ｍｌ的混合溶液．展開硅膠G自制板,厚度0.5ｃｍ；點樣1～2ｍｌ．以lv仿－乙酸乙酯－甲醇－水（15:40:22:10）10℃以下放置后的下層溶液為展開劑,上行展開12～14ｃｍ．顯色噴硫酸乙醇溶液（110）,105℃加熱至斑點顯色清晰,置紫外光燈（365nm）下觀察,樣品與對照品在相同位置顯相同色斑．
3.DNA分子遺傳標記鑒定:用RAPD、DNA測序等方法鑒定人參、西洋參DNA測序:Fushimi等對人參屬３種植物人參、西洋參和竹節參藥材以及相關新鮮材料,采用18S-rRNA基因片斷通用引物對18SF和18SR,通過PCR擴增,結果得到了約1.8kb片段的PCR產物．經過DNA測序發現3種藥材間的18S-rRNA基因片斷上第497、499、501和712號核苷酸序列不同,可用來鑒別人參及其相關藥材．進一步采用matK基因片斷通用引物對matKAF和matK8R,經過DNA測序發現西洋參與人參、竹節參間的matK基因片斷上核苷酸序列差異可用來鑒別人參與西洋參．
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